本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的骨成型蛋白9（BMP-9）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá)0.16 ng/mL，適用于骨代謝、血管生成及胚胎發(fā)育研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)elisa試劑盒 | 英文名稱 | BMP-9 ELISA Kit |
貨號 | CS-1090E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗小鼠BMP-9抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，BMP-9被固相抗體捕獲。
檢測：加入純化的抗小鼠BMP-9抗體和HRP標(biāo)記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
樣本要求：
1. 血清：避免溶血脂血，離心分離，-20℃分裝，禁反復(fù)凍融。
2. 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝，慎用肝素，離心取上清。
3. 細(xì)胞上清：離心除雜質(zhì)，-80℃保存。
4. 組織勻漿：冰上勻漿、高速離心取上清低溫儲存。
5. 禁忌：勿加疊氮鈉抑制 HRP；拒收污染溶血樣本，建議復(fù)孔檢測。
操作步驟：
試劑準(zhǔn)備將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進(jìn)行梯度稀釋，配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
實(shí)驗(yàn)流程加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品，37℃孵育。加酶標(biāo)抗體：除空白孔外，每孔加入酶標(biāo)抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復(fù)洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。終止：每孔加入終止液，混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。檢測：在 450nm 波長下測定各孔 OD 值，15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
關(guān)鍵提示實(shí)驗(yàn)全程嚴(yán)格控溫，孵育時使用封板膜避免蒸發(fā)。洗滌需充分，否則易造成高背景、結(jié)果偏差。顯色液需避光，終止順序與加樣順序保持一致，確保充分混勻。
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